imatinib`e dirençli k-562 hücre serisinde 6

İMATİNİB’E DİRENÇLİ K-562 HÜCRE SERİSİNDE 6-SHOGAOL’UN
ETKİLERİNİN ANALİZİ
POSTERİN ARAŞTIRMACILARI
HANİFE PAMUK, MERVE VAROL, GÜLER YAMAN, GÜLŞAH CEYLAN YAĞIZ,
ÇİĞDEM AKDEMİR
POSTER DANIŞMANLARI
PROF.DR. ASUMAN SUNGUROĞLU, DOÇ.DR. KENAN KÖSE
AMAC
KML tedavisinde gelişen ilaç direnci sonucu tedavi başarısı azalmaktadır. Direncin
kırılması amacıyla bitkisel kaynaklara yönelim artmıştır. Amacımız; BCR-ABL genini
taşıyan K-562 KML hücre serilerinde oluşturulmuş İmatinib (Tirozin Kinaz İnhibitörü)
direncinde, zencefilin etken maddesi olan 6- Shogaol’ün ilaç direnci, apoptoz ve canlılık
üzerine etkilerininin invitro düzeyde araştırılmasıdır.
GEREÇ VE YÖNTEM
Bu çalışma Ankara Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı'nda Mart Mayıs 2015 tarihleri arasında gerçekleştirilen bir deneysel laboratuvar çalışmasıdır.
İmatinib duyarlı K-562s hücrelere sadece 6-Shogaol ve İmatinib dirençli K-562r hücre
serilerine 6-Shogaol ve İmatinib uygulanarak MTT canlılık testi yapılmıştır. İlaç uygulaması
sonucunda apoptoztan ve dirençten sorumlu genlerin ifadelerinin değişimini belirlemek için
RNA izolasyonu ve bunu takiben cDNA sentezi yapılmıştır. Elde edilen cDNA örneklerinden,
qRT-PCR yöntemi kullanılarak MDR, MRP, OCT-1, BAX, BCL-2 genlerinin ifadesi
kantitatif olarak analiz edilmiştir. Apoptoz tayini için hücreler, Anneksin V antikoru ile
işaretlenerek akım sitometrisinde analiz edilmiştir. Proje sonuçları T-test kullanılarak
yorumlanmıştır.
BULGULAR
MTT sonucuna göre 6-Shogaol’ün dirençli ve duyarlı her iki hücre serisi için etkin dozu ve
saati ( IC 50 inhibitör doz) 48. Saat ve 50 µM olarak belirlenmiştir. 6-Shogaol uygulanan
Duyarlı ve Dirençli KML hücre serilerinde anti-apoptotik Bcl-2 gen ifadesinde istatistiksel
düzeyde anlamlı azalma saptanırken, BAX gen ifadesinde artış saptanmıştır. 6-Shogaol
uygulanan her iki hücre serisinde ilaç direnç genlerinden MDR gen ifadesinde artış
saptanırken, MRP gen ifadesinde duyarlı hücrelerde azalma saptanmıştır. İnfluks OCT-1 gen
ifade seviyesinde azalma saptanmıştır.
SONUÇ
Literatürde ilk kez gerçekleştirilen bu çalışmada, 6-Shogaol’ün İmatinib duyarlı ve
dirençli K-562 hücre serilerinde apoptozu indükleyerek hücrelerin ölümüne neden olduğu
gösterilmiştir. Bu sonuçlar; 6-Shogaol’ün hipotezimizden farklı olarak, MDR, MRP veya
OCT-1 dışında farklı mekanizmaları kullanarak hücrelerde etkili olduğu şeklinde
yorumlanmıştır.
ANAHTAR KELİMELER
KML, K-562, İmatinib direnci, 6-Shogaol, Zencefil