KimyaKongreleri.org

P-16
Manyetik Nanopartiküllere Papain İmmobilizasyonu
Pelin ALPAYa, Deniz AKTAŞ UYGUNa, Sinan AKGÖLb, Adil DENİZLİc
a
Adnan Menderes Üniversitesi, Fen Edebiyat Fakültesi, Kimya Bölümü, Aydın
b
Ege Üniversitesi, Fen Fakültesi, Biyokimya Bölümü, İzmir
c
Hacettepe Üniversitesi, Fen Fakültesi, Kimya Bölümü, Ankara
daktas@adu.edu.tr
Özet: Enzim immobilizasyonunda destek materyali olarak manyetik nanopartikülleri
kullanma daha büyük yüzey alanı, daha düşük kütle transfer direnci ve manyetik alanda
daha kolay geri kazanım gibi avantajlara sahiptir [1]. Papain enzimi (E.C. 3.4.22.2)
kinetik ve yapısal olarak oldukça iyi karakterize edilmiş ve geniş bir proteolitik aktivite
gösteren önemli bir enzimdir. Papain enziminin immobilizasyonuna duyulan gereksinim
bu enzimin endüstriyel ve tıbbi uygulamalarındaki önemi nedeniyledir [2]. Boya
ligandları laboratuar ve geniş skalalı enzim immobilizasyonu işlemlerinde yaygın olarak
kullanılmaktadır. Boya ligand afinite kromatografisinde destek materyali olarak manyetik
nanopartiküllerin kullanılması birçok avantajından dolayı son yıllarda oldukça artmıştır.
Bu çalışmada papain enziminin immobilizasyonu için manyetik nano-poli(2hidroksietilmetakrilat-ko-glisidil metakrilat) [mag-nano-poli(HEMA-GMA)] yapıları
emülsiyon polimerizasyonu tekniği ile hazırlanmış ve bu manyetik nanopartiküllere
Cibacron Blue F3GA kovalent olarak bağlanmıştır. Daha sonra boya bağlı manyetik
nanopartiküllere
papain
enziminin
immobilizasyonu
adsorpsiyon
yoluyla
gerçekleştirilmiştir. Hazırlanan manyetik nanopartiküllerin boyut ve yüzey özellikleri
SEM ve AFM analizleri ile incelenmiştir. SEM ve AFM analizleri ile hazırlanan
manyetik nanopartiküllerin küresel yapıda ve yaklaşık 200 nm boyutunda olduğu
bulunmuştur. Ayrıca SEM-EDX analizleri ile manyetik nanopartiküllere kovalent olarak
bağlanan Cibacron Blue F3GA miktarı hesaplanmıştır. Boya bağlı manyetik
nanopartiküllerin papain adsorpsiyon kapasitesi 1.0 mg/mL papain derişiminde ve pH 7.0
HEPES tamponunda 764.0 mg/g polimer olarak bulunmuştur. İmmobilizasyona
sıcaklığın, iyonik şiddetin ve papain derişiminin etkisi incelenmiştir. Sonuç olarak bu
çalışmada ucuz, basit ve etkin bir papain immobilizasyonu işlemi gerçekleştirilmiştir.
Anahtar Kelimeler: Papain, immobilizasyon, manyetik nanopartikül
Kaynaklar
[1]. Li, G-Y., Zhou, Z-D., Li, Y-J., Huang, K-L. Zhong, M. 2010.. Journal of Magnetism and Magnetic
Materials, 322: 3862-3868..
[2]. Lei, H., Wang, W., Chen, L-L, Li, X-C., Yi, B., Deng, L. 2004.. Enzyme and Microbial Technology,
35: 15-21.
- 40 -
KimyaKongreleri.org