419 XIX. Ulusal Kimya Kongresi, Kuşadası, 2005 BKS10 Trametes

XIX. Ulusal Kimya Kongresi, Kuşadası, 2005
BKS10
Trametes versicolor’DAN ELDE EDİLEN MANGAN PEROKSİDAZ ENZİMİNİN
ÜRETİMİ VE KISMİ SAFLAŞTIRILMASI
Burçin Güngör, Nurdan Pazarlıoğlu
Ege Üniversitesi, Fen Fakültesi, Biyokimya Bölümü 35100 Bornova-İZMİR
Mangan peroksidaz (EC 1.11.1.13 Mn (II):Hidrojen peroksit oksidoredüktaz) ekstraselüler bir
enzim olup, bir Hem molekülü, %17 nötral karbohidrat ve yüksek oranda asidik amino asit
içermektedir. Mangan peroksidazın prostetik grubu, demir protoporfirin IX dir. Enzimin asıl
fonksiyonu, oksidant olarak olarak H2O2’i kullanarak Mn+2 yi Mn+3 e oksitlemektir. Mangan
peroksidaz, kompleks Mn+2 yi indirgeyici substrat olarak kullanan tek peroksidazdır (1).
Mangan peroksidaz tepkimelerinde mangana olan gereksinim enzimin, pirofosfat, tartarat ve
laktat gibi bazı ligantların varlığında Mn+2 nin Mn+3 e oksidasyonunu katalizlemesinden
kaynaklanır. Enzim, Mn+3-okzalat kompleksinden daha yüksek redoks potansiyeline sahip
fenolik
olmayan
lignin
bileşikleri
ve polisiklik
aromatik
hidrokarbonları
(PAH)
oksitlemektedir (2). Mangan peroksidaz aktivitesinin izlendiği ölçümlerde; kolaylıkla Mn+3
tarafından oksitlenen ve tayin için gerekli renk değişimlerini veren fenolik bileşikleri
kullanılmaktadır. Bununla birlikte; Mn+3 tarafından ligninin hem fenolik hem de fenolik
olmayan bileşiklerinin oksitlenmesinde etkili olduğu gösterilmektedir (3). Trametes
versicolor kültürlerinde Mangan peroksidaz enzimi bulunmaktadır. Trametes versicolor beyaz
çürükçül bir fungustur. Mangan peroksidazın da içinde bulunduğu ligninolitik enzimleri
ekstraselüler bölgeye salgılar (4). Yapılan çalışmada, Trametes versicolor’ dan Mangan
peroksidaz üretimi değişik indüktörler varlığında gerçekleştirildi. Elde edilen enzimin kısmi
saflaştırılması yapılarak 2,6-dimetoksifenolün oksidasyon hızının saptanması ve ortama H2O2
eklenmesiyle başlayan reaksiyonun 469 nm’ deki absorbansının ölçülmesiyle aktivite tayini
yapıldı. Ortam koşulları optimize edildi.
Kaynaklar
1. A. Paszczynski, V. B. Huynh, R.L. Crawford, FEMS, 1985, 29:37-41.
2. L. Banci, S. Ciofi-Baffoni, M. Tien, Biochemistry, 1999, 38:3205-3210.
3. K.E. Hammel, M.A. Moen, Enzy. Microbiol. Technol., 1991, 13:15-18.
4.
H. Tanaka, S. Itakura, A. Enoki, Journal of Biotechnology, 1999, 75:57-70.
419