1. Kullanım Amacı 2. Klinik Uygulama ve Test

1. Kullanım Amacı
AESKULISA DANA-Pro insan serumunda sekiz hücresel ve nüklear antijene karşı
IgG antikorlarının kalitatif belirlemesi için solid fazlı bir enzim immunotesttir.
Kuyucuklar, rekombinant dsDNA, 70 kDa U1 snRNP, SS-B, SS-A 52 kDa, Scl 70,
centromere protein B (CenpB), Jo-1 ve oldukça purifiye doğal insan Sm ve SS-A 60
kDa ile kaplıdır.
Test sistemik romatizmal hastalığın diferansiyel tanısında kullanılır.
2. Klinik Uygulama ve Test Prensibi
Anti-nüklear antikorlar (ANA), sistemik romatizmal hastalığın diferansiyel tanısındaki
en önemli araçtır. İndirek immunofloresan testi (IFT) HeLa gibi ökaryotik hücrelerde
ANA belirlemek için yapılan bir yöntemdir. Tek antikor özgünlüğü floresan pattern ile
ayırt edilir fakat, daha spesifik olan ELISA ile hedef antijenler kullanılarak ANA ların
tek ve güvenilir farklılaştırılması yapılabilir.
ANA lar özellikle aktif ve inaktif sistemik lupus erythematosus (SLE), karışık bağ doku
hastalıkları (MCTD), scleroderma, Sjögren`s sendromu, polymyositis de bulunur.
ANA ya karşı antikorlar:
- çift iplikli DNA (dsDNA) DNA nın fosfat ünitesine karşıdır. dsDNA ya karşı
antikorlar SLE nin aktif fazı boyunca bulunur ve çeşitli hastalıklarla ilişkilidir. AntidsDNA antikorlar, SLE tanısı için 11 ACR kriterinden biridir.
- U1 snRNP, U1 snRNPnin 70 kDa proteinini yönetir. Bunlar MCTD içien
patognomiktir, SLE de de görülürler. Bu antijenlere karşı yüksek titrede antikorlar
Sharp-Syndrome için spesifiktirler.
- snRNP/Sm, Sm ve U1-snRNP proteinlerini (70 kDa, A ve C) yönetir. SLE,
Sjögren`s sendromu, scleroderma ve polymyositis de görülürler.
- SS-A (Ro; 52 kDa ve 60 kDa nın çözülebilir stoplazmik ve/veya nüklear
ribonükleoproteinleri) ve SS-B (La; with RNA polymerase III ile ilişkili 48 kDa
protein) ye karşı antikorlar primer ve sekonder Sjögren`s sendromu, SLE, konjenital
kalp yetmezliği ve neonatal lupusda yüksek titrede bulunurlar.
- Scl-70, DNA-topoisomerase I e karşı yönetir. Sistemik scleroderma için oldukça
spesifiktir ve çeşitli yönler için ipucu verir.
- CenpB (80kDa centromere protein B), sistemik sclerosisin küçük bir kopyası olan
CREST-Sendromunda (69% CREST-hastaları) tipiktir.
- Jo-1, direk histidyl-tRNA synthetase (protein biyosentezinde gereken sitoplazmik
protein) a karşıdır ve polymyositis ve dermatomyositis hastalrının 20-40 % ında
bulunur.
8. Kalitatif Yorumlama
Cut-off kalibratör ve hasta örneklerinin optik densitesini okuyun. Cut-off kalibratör
ODsi, lot spesifik QC sertifikası ile sağlanan parametrespesifik faktör ile çarpılır.
Hastaların ODlerini cut-off kalibratör ODleri ile karşılaştırın. Cut-off dan yüksek olan
tüm örnekler pozitiftir.
OD Cut-off kalibratör
Negatif:
x antijen spesifik faktör = ODcut-off
OD hasta < OD cut-off parametre
Pozitif:
OD hasta > OD cut-off parametre
DANA-Pro
parametre
OD 450/620 nm
Negatif Kontrol
Cut-off Kalibratör
0.033
0.550
Yorumlama Örneği
Herbir çalışma için cut-off kalibratörü paralel pipetlemenizi öneririz.
Sekiz antijen spesifik faktör lot spesifiktir ve kit ile birlikte verilen kalite kontrol bilgi
ekinde bulunabilir !
U1-snRNP 70 kD Faktör = 1.0
OD-cut off parametre 0.550 x 1.0 = 0.550
OD hasta 0.999 > 0.550 = Pozitif
Do not use this example for interpreting patients results!
Bu örneği hasta sonuçlarınızı yorumlamak için kullanmayınız!
Sınırda olana örneklerinizi tekrar test etmenizi öneririz. Lot spesifik bilgi için kalite
kontrol ekine bakın. Medikal laboratuarlar, EU düzenlemelerine göre kendi kontrol
ve/veya iç serum havuzlarından in-house Kalite Kontrollerini kullanabilirler.
Sonuçların yarı-kantitasyonu için, herbir hasta-OD değeri İndeks-Değeri ile
belirlenebilir. Indeks-Değeri hasta-ODlerinin cut-of-ODlerine bölünmesi ile bulunur:
OD (hasta örneği)
Indeks Değeri =
OD (cut-off parametre)
10.1 Özgünlük ve Duyarlılık
Mikroplate yüksek purifiye ve/veya rekombinant antijenler (dsDNA, U1 snRNP
70kDa, Sm, SS-A, SS-B, Scl-70, CenpB, Jo-1) ile kaplıdır. Diğer otoantijenlerle
çapraz-reaksiyon bulunmamıştır. ANA sadece SLE spesifik değildir, çeşitli
romatizmal hastalıkta bulunur. ANA belirlemesi aktif SLE için çok duyarlı bir markırdır
ve tüm olguların >99% unda pozitiftir.
Testler-arası
Test-içi
DANA-Pro
DANA-Pro
Ortalama
OD Oranı
VK (%)
dsDNA
4.2
1.0
0.8
U1RNP
3.2
0.8
1.8
1.0
Sm
4.1
1.1
SSA
3.5
1.2
SSA
3.9
0.9
SSB
2.8
1.0
SSB
1.5
0.7
Scl-70
1.2
1.5
Scl-70
1.4
1.9
CenpB
1.5
1.1
CenpB
2.5
1.2
Jo-1
1.0
1.2
Jo-1
2.4
0.8
Ortalama
OD Oranı
VK (%)
dsDNA
2.1
0.4
U1RNP
3.1
Sm