KODU: 399142 PCR SYSTEM EXPAND LONG TEMPLATE(Roche ve 1 681 834 veya eşdeğeri) TEKNİK ŞARTNAMESİ 1. Yaklaşık 190 reaksiyon gerçekleştirebilecek miktarda malzeme içermeli.(50 UL PCR reaksiyon hacmi ile.) 2. Kit içeriğinde: Expand Long Template Enzim Karışımı: 2 x 72 UL (2 x 360 U) Enzim saklama tamponu: 20 mM Tris-HCl, pH 7.5(25°C), 100 mM KCl, 1 mM dithiothreitol (DTT), 0.1 mM EDTA, %0.5 Nonidet P40 (v/v), %0.5 Tween 20 (v/v), %50 gliserol (v/v). Expand Long Template Buffer 1: 2 x 1 mL 10X konsantrasyonunda olmalı, 17.5 mM MgCl2 içermeli, 0.5-9 kb uzunlukta genomik DNA fragmanlarını etkili bir şekilde amplifiye etmek için optimize edilmiş olmalıdır. Expand Long Template Buffer 2: 2 x 1 mL 10X konsantrasyonunda olmalı, 27.5 mM MgCl2 içermeli, 9-12 kb uzunlukta genomik DNA fragmanlarını etkili bir şekilde amplifiye etmek için optimize edilmiş olmalıdır. Expand Long Template Buffer 3: 2 x 1 mL 10X konsantrasyonunda olmalı, 27.5 mM MgCl2 ve deterjanlar içermeli, 12 kb ve daha büyük uzunlukta genomik DNA fragmanlarını etkili bir şekilde amplifiye etmek için optimize edilmiş olmalıdır. 3. Expand Long Template Enzim Karışımı sıcaklığa dayanıklı Taq DNA polimeraz ve sıcaklığa dayanıklı, hata düzeltme(3’-5’ eksonükleaz) aktivitesine sahip Tgo DNA polimeraz içermelidir. 4. Modifiye edilmiş nükleotidlerin (DIG-dUTP, Biotin-dUTP ve Florasan-dUTP vb.) zincire katılmasına olanak sağlamalıdır 5. dUTP’nin zincire katılmasına olanak sağlamamalıdır. 6. Enzim karışımının optimum sentez sıcaklığı 68°C, hacim aktivite değeri 5 U/mL olmalıdır. 7. Expand Long Template Enzim karışımı kontaminasyona neden olacak aktiviteler(endonükleaz ve eksonükleaz aktiviteleri vb.) bakımından test edilmiş olmalıdır. 8. İstekliler, Teklif edilen malzemenin ihale dokümanında belirtilen şartlara uygunluğunu teyit etmek amacıyla numunelerini (ihale tarihinden itibaren 5(beş) gün içerisinde), varsa ayrıntılı teknik bilgilerinin yer aldığı katalogları ve benzeri tanıtım materyallerini vereceklerdir. Laboratuarımızda denenmiş olup uzun bölge PCR uygulamalarında üstün kalite ve miktarda sonuç verdiği jel analiziyle görülmüş olmalıdır.