NEB Cloning Box 1. Klonlama deneylerini, en 9ok kullanilan

advertisement
NEB Cloning Box
1. Klonlama deneylerini, en 9ok kullanilan enzimler ve optimize bir protokol
ile hizlandirabilir olmahdir.
2. Kutu 10.000 finite Bamffl-HF, 10.000 unite EcoRI-HF, 10.000 finite
Hindlll-HF, 500 finite Notl-HF enzimleri ile 100 reaksiyon(SO^l) PCR
master miksi, 1.000 unite Antarktik Fosfataz, 30 reaksiyon hizh ligasyon
kiti, DNA belirteci, gerekli restriksiyon enzim tamponlan, BSA ve jel
yiikleme tamponu ifermelidir.
3. I9erigindeki tiim restriksiyon enzimleri 5 dakikada kesim
ger9ekles. tirebilir ve HF ozelligine sahip enzimler olmahdir.
4. Iferigindeki restriksiyon enzimlerinin star aktiviteleri en aza indirilmi§
olmahdir.
5. J9erigindeki fosfataz ile DNA, RNA, dNTP ve protein defosforilasyonu
saglanabilir olmahdir.
6. Hizh ligasyon kiti sayesinde oda sicakliginda 5 dakikada ligasyon
ger9ekles. irebilir olmahdir.
7. J9eriginde bulunana HF-DNA polimeraz sayesinde hizh ve dogru
Polimeraz Zincir Reaksiyonlan ger9ekle§tirebilir olmahdir.
Download