T.C. MEHMET AKİF ERSOY ÜNİVERSİTESİ MÜHENDİSLİK-MİMARLIK FAKÜLTESİ GIDA MÜHENDİSLİĞİ BÖLÜMÜ LİSANS TEZİ B Rabia FAKI Kübra KOCATÜRK Gamze ESGİN BURDUR, 2016 T.C. MEHMET AKİF ERSOY ÜNİVERSİTESİ MÜHENDİSLİK-MİMARLIK FAKÜLTESİ GIDA MÜHENDİSLİĞİ BÖLÜMÜ LİSANS TEZİ FARKLI TİP KEÇİ PEYNİRLERİNDE KONJUGE LİNOLEİK ASİT İÇERİĞİ VE YAĞ ASİDİ KOMPOZİSYONLARININ BELİRLENMESİ Rabia FAKI (Öğrenci No: ) Kübra KOCATÜRK (Öğrenci No:) Gamze ESGİN (Öğrenci No:) Danışman: Doç. Dr. Oğuz GÜRSOY BURDUR, 2016 LİSANS TEZİ ONAY FORMU Rabia FAKI, Kübra KOCATÜRK ve Gamze ESGİN tarafından hazırlanan “Farklı Tip Keçi Peynirlerinde Konjuge Linoleik Asit İçeriği ve Yağ Asidi Kompozisyonlarının Belirlenmesi” başlıklı tez tarafımdan okunmuş, kapsamı ve niteliği açısından Lisans Tezi olarak kabul edilmiştir. Tez Sunum Tarihi: 17/05/2016 Doç. Dr. Oğuz GÜRSOY (Danışman) Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi Mühendislik-Mimarlık Fakültesi Gıda Mühendisliği Bölümü ETİK KURALLARA UYGUNLUK BEYANI Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi Mühendislik-Mimarlık Fakültesi Gıda Mühendisliği Bölümü Lisans Tezi Hazırlama hükümleri uyarınca Lisans Tezi olarak sunduğumuz “Farklı Tip Keçi Peynirlerinde Konjuge Linoleik Asit İçeriği ve Yağ Asidi Kompozisyonlarının Belirlenmesi” başlıklı bu tezin; Kendi çalışmamız olduğunu, Sunduğumuz tüm sonuç, doküman, bilgi ve belgeleri bizzat ve bu tez çalışması kapsamında elde ettiğimizi, Bu tez çalışmasıyla elde edilmeyen bütün bilgi ve yorumlara atıf yaptığımızı ve bunları kaynaklar listesinde usulüne uygun olarak verdiğimizi, Kullandığımız verilerde değişiklik yapmadığımızı, Tez çalışması ve yazımı sırasında patent ve telif haklarını ihlal edici bir davranışımızın olmadığını, Bu tezin herhangi bir bölümünü bu üniversite veya diğer bir üniversitede başka bir tez çalışması içinde sunmadığımızı, Bu tezin planlanmasından yazımına kadar bütün safhalarında bilimsel etik kurallarına uygun olarak davrandığımızı, bildirir, aksinin ortaya çıkması durumunda her türlü yasal sonucu kabul edeceğimizi beyan ederiz. 17 / 05 / 2016 Rabia FAKI Kübra KOCATÜRK Gamze ESGİN ÖNSÖZ ve TEŞEKKÜR Bu araştırma için beni yönlendiren, karşılaştığım zorlukları bilgi ve tecrübesi ile aşmamda yardımcı olan değerli Danışman Hocalarım Doç. Dr. Oğuz GÜRSOY ve Prof. Dr. Mehmet KALE’ye teşekkürlerimi sunarım. Laboratuvar çalışmalarım sırasında yardımını ve desteğini esirgemeyen değerli hocam Araş. Gör. Sait Hasbi SALTIK’a teşekkür ederim. 0268-YL-15 No`lu Proje ile tez çalışmamı maddi olarak destekleyen Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Koordinatörlüğü’ne teşekkür ederim. Eğitim hayatımın her aşamasında beni her anlamda destekleyen aileme sonsuz sevgi ve saygılarımı sunarım. Mayıs 2016 Rabia FAKI Kübra KOCATÜRK Gamze ESGİN i İÇİNDEKİLER Sayfa ÖNSÖZ VE TEŞEKKÜR....................................................................................................i İÇİNDEKİLER ....................................................................................................................ii ŞEKİLLER DİZİNİ .............................................................................................................iii ÇİZELGE DİZİNİ ...............................................................................................................iv SİMGELER VE KISALTMALAR DİZİNİ ........................................................................v ÖZET ...................................................................................................................................vi ABSTRACT ........................................................................................................................ vii 1. GİRİŞ ............................................................................................................................... 1 2. GENEL BİLGİLER .........................................................................................................4 2.1. Virüslerin Özellikleri ........................................................................................ 4 2.2. Virüslerin Yapısı ............................................................................................... 4 2.3. Virüslerin Sınıflandırılması ..............................................................................5 2.4. Gastroenterit Etkeni Olarak Virüsler ................................................................ 6 2.4.1. Astrovirüs ........................................................................................... 7 2.4.2. Norovirüs ........................................................................................... 10 2.4.3. Rotavirüs ............................................................................................ 16 2.5. Enzim Bağlı İmmünosorbent Analizi (ELISA) ................................................20 3. MATERYAL-YÖNTEM ................................................................................................ 22 3.1. Örneklem ve Materyal ......................................................................................22 3.2. Gaita Örneklerinin Toplanması ........................................................................22 3.3. El Swap Örneklerinin Toplanması....................................................................23 3.4. Enzim Bağlı İmmünosorbent Analizi (ELISA) ................................................24 3.4.1. ELISA Yöntemi ile Virüs Antijenlerinin Aranması .......................... 25 4. ARAŞTIRMA BULGULARI ......................................................................................... 29 5. TARTIŞMA .....................................................................................................................34 8. SONUÇ............................................................................................................................ 37 KAYNAKLAR ....................................................................................................................38 EKLER ................................................................................................................................ 44 ÖZGEÇMİŞ ......................................................................................................................... 45 ii ŞEKİLLER DİZİNİ Sayfa Şekil 1. Zarflı virüsün genel yapısı .....................................................................................1 Şekil 2. Gelişmiş ve gelişmekte olan ülkelerde çocuklarda görülen gastroenterit etkenlerin dağılımı ..................................................................................................3 Şekil 3. Astrovirüsün elektron mikroskobik görüntüsü ......................................................8 Şekil 4. Norovirüsün geçirimli elektron mikroskobik (TEM) görüntüsü............................ 11 Şekil 5. Rotavirüs partiküllerinin geçirimli elektron mikroskobundaki (TEM) görüntüsü .................................................................................................................16 Şekil 6. Çocuklarda gastroenterit etkenlerinin dağılımı ......................................................17 Şekil 7. Enzim bağlı immünosorbent analizi ......................................................................21 Şekil 8. Gaita örneklerinin toplanması ................................................................................23 Şekil 9. El swap örneklerinin toplanması ............................................................................24 Şekil 10. Araştırmada kullanılan Astrovirüs, Norovirüs ve Rotavirüs kitleri .....................26 Şekil 11. Virüs antijenlerinin aranması için ELISA analizlerinin uygulanması ................27 Şekil 12. Araştırmada kullanılan ELISA mikroplaka okuyucu ...........................................28 Şekil 13. Çalışmaya katılan personelin cinsiyet dağılımı ve yaş aralıkları ......................... 29 Şekil 14. Çalışmaya katılan personelin eğitim durumları ...................................................30 Şekil 15. Mikroplaka sonuç fotoğrafları .............................................................................33 iii ÇİZELGE DİZİNİ Sayfa Çizelge 1. Virüslerin sınıflandırılması ................................................................................6 Çizelge 2. Sağlıklı yetişkin gönüllülerde Rotavirüs alındıktan sonra görülen semptomlar ve görülme sıklıkları .......................................................................18 Çizelge 3. Çalışmada kullanılan ticari ELISA kitlerinin içerikleri .....................................25 Çizelge 4. Çalışmaya katılan, sigara kullanan, hijyen eğitimi alan ve çalışma esnasında eldiven kullanan personel sayıları ......................................................29 Çizelge 5. ELISA mikroplaka okuyucuda el ve gaita süzüntüsü örnekleri için okunan optik yoğunluk değerleri .........................................................................32 iv ÖZET Lisans Tezi Farklı Tip Keçi Peynirlerinde Konjuge Linoleik Asit İçeriği ve Yağ Asidi Kompozisyonlarının Belirlenmesi Rabia FAKI, Kübra KOCATÜRK, Gamze ESGİN Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi Mühendislik-Mimarlık Fakültesi Gıda Mühendisliği Bölümü Danışman: Doç. Dr. Oğuz GÜRSOY Mayıs, 2016 Astrovirüs (AsV), Norovirüs (NoV) ve Rotavirüs (RoV) insanlarda viral kaynaklı gastroenterit vakalarının en önemli etkenleri arasında görülmektedir. Bu tez çalışmasında Burdur il merkezi ve Bucak ilçesindeki 5 farklı süt ve süt ürünleri işletmesinin üretim bölümünde çalışan 47 personelin ellerinden (el ayası, el üstü, el parmak araları ve el tırnak uçları) alınan swap örneklerinde ve gaitalarında AsV, NoV ve RoV antijenlerinin varlığının enzim bağlı immünosorbent analizi (ELISA) ile belirlenmesi amaçlanmıştır. Ayrıca araştırmaya katılan personelin yaş, eğitim düzeyi, sigara içme durumu, hijyen eğitimi alıp almadıkları ve eldiven kullanımı ile ilgili bilgiler ile çalışmanın yapıldığı dönemde ishal, kusma ve karın ağrısı gibi sindirim sistemi semptomları olup olmadığı anket ile belirlenmiştir. Çalışma sonucunda 1 personelin gaitasında NoV antijeni tespit edilirken incelenen diğer el swap örnekleri ile gaita örneklerinde AsV, NoV ve RoV virüs antijenlerine rastlanmamıştır. Yapılan anket çalışmasında çalışan 47 personelden 42’sinin sıklıkla, 4’ünün de nadiren eldiven kullandığı belirlenmiştir. Çalışmaya katılan 47 personelden 7’sinin hijyen eğitimi almadığı, hijyen eğitimi almayanlardan 1 kişinin de eldiven kullanmadığı tespit edilmiştir. Yine gaitasında NoV antijeni tespit edilen personelin hijyen eğitimi almadığı görülmüştür. Sonuç olarak, çalışma kapsamında olan gıda işletmelerinde çalışan personel ile çalışma ortamlarının virolojik açıdan hijyenik koşullar bakımından uygun ve yeterli olduğu söylenebilir. Ancak bir işletme çalışanının gaitasında NoV antijenin tespit edilmesi işletme personeline ve personelin üretim zincirinde özellikle ambalajlama sırasında temas ettiği gıda maddelerine viral bulaşma potansiyelinin yüksek olduğunu göstermektedir. Bu nedenle gıda işletmelerinde hijyen eğitimi muhtemel enfeksiyon ve salgınların önlenmesi ve iş gücü kayıplarının engellemesi açısından son derece önemlidir. Anahtar Kelimeler: Astrovirüs, Norovirüs, Rotavirüs, ELISA, Süt işletmesi Hazırlanan bu Lisans Tezi TÜBİTAK 2209A-Mehmet Akif Ersoy Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Koordinatörlüğü tarafından desteklenmiştir. 5 6