Poster-28 IV. Ulusal Afinite Teknikleri Kongresi, 4-7 Mayis 2008, Mugla Üniversitesi, Mugla SiSTEMiK LUPUS ERiTEMA TOS VE PRiMER ANTiFoSFOLiPiD SENDROMU BASTA PLAZMALARINDAN DNA niDROLiZE EDici OTOANTiBADiLERiN HiSTiDiN LiGA1~ AFiNiTE KROMATOGRAFiSi iLE TEK BASAMAKTA AYRILMASI Assem Elkak 1, Hiam Matta 2, Lokman Uzun J I Liibnan Universitesi, Eczaclilk Fakiiltesi, Tlbbi Biyoloji Boliimii, Liibnan Elarz Hastanesi, Zalka, Liibnan 2 3Hacettepe Universitesi, Kimya Boliimii, Biyokimya Anabilir.n Daft, Ankara Histidin protein yapIsmda nadir bulunan amino asitlerden biridir. bi1e~iminin %2'sini olu~turmaktadlr. Yak1a~tk toplam amino asit Histidin, bir ¥ok enzimin katalizinde ve biyotantma olaylannda onemli gorevler fistlenmektedir. Histidin yaplsmda bulunan imidazol grubu, bu amino aside fizyolojik pH degerlerinde iyi bir tampon ozelligi kazandlrmaktadtr. Proteinlerde, mikro'(evreye bagb olarak histidinin pKa degeri 5.5 ve 7.0 arahg.nda degi~mektedir. Pseudospesifik ligand olarak histidin, ta~ldlg. karboksil, amino ve imidazol gruplan He proteinlerle izoelektrik noktalannda veya civannda etkile~ebilir. Bu ozelligi sayesinde hlstidin, Mere kUltiirlerinden monoklonal antibadilerin ve insan plazmasmdan IgG alt slmflannm belirgin bir etkinlik gostermi~tir. '(e~it1i safla~t1TIlmasmda Biyoligandlar ile ktyaslandlg.nda pseudospesifik ligandlar olan kii'(Uk: amino asit molekiilleri, endfistriyel oI'(ekteki afinite safla~t1rmasl i~in onemE avantajlara sahiptir. Bu avantajlar, i.iri.ine Iigandm SlzmaSl durumunda herhangi bir immiin tepkiye neden oimamalan ve biyolojik aktivitelerini korumalan i'(in protein ligandlar<u; oldugu gibi spesifik bir ii\1 ' boyutlu yaplya ihtiya'( duymamalandlr. Sunulan yalt~mada, histidin ligand afinite kromatografisi ile sistemik lupus eritematos ve primer antifosfolipid sendromu hasta plazmaIannda DNA hidrolize edici otoantibadiler aynlnn~trr. Bu ama'Yla histidil-aminohekzil-sefaroz jeller kullamlnn~trr. Otoantibadilerin aynlmas] yum~ak kromatografik ko~ullar aIt1nda ger'(ekle~tiriImi~tir. insan IgG altsmlflanmn dagthml kolondan alman farkll fraksiyonlar-da enzim bagh immlinsorbent kiti He belirlenmi~tir. Safla~t1TIlan otoantinadilerin hidroliz ozellikleri plasmid DNA kullamlarak belirlenmi~tir. 74 KimyaKongreleri.org DNA hidrolize edici I