GLUKOZ 6-FOSFAT OEHiOROGENAZ ENZiMiNiN VAN GOLO

I. Ulusal Afinite Teknikleri Kongresi, 22-24 Haziran 2005, Hacettepe Üniversitesi, Ankara
SoziO Sunum-17
GLUKOZ 6-FOSFAT OEHiOROGENAZ ENZiMiNiN VAN GOLO BALIGI KARACiGER VE ERiTROSITLERINOEN SAFLA~TIRILMASI VE KARAKTERIZASYONU Muhammet Altun 1 , Vedat Turkoglu 1, Mehmet Ciftd, Hasan Ozdemi~, O.irfan Kufrevioglu 2 ' 100. ytl Universitesi Fen-Edebiyat Fakiiltesi Kimya Bbliimii - Van 2Atatiirk Oniversitesi Fen-Edebiyat Fakiiltesi Kimya Bbliimii- Erzurum Glukoz 6-fosfat dehidrogenaz enzimi (D-Glukoz 6-fosfat: NADp· oksidoreduktaz, EC
1.1.1.49, G6PD) pentoz fosfat yolunun ilk ve allosterik enzimidir. Pentoz fosfat yolunun
hedefi, indirgeyici olaylar ic;:in gerekli NADPH uretmek ve ATP, NAD·, FAD, DNA, RNA gibi
bile~ikler
ic;:in on bile!;iik olan riboz 5-fosfat sentezlemektir (1,2). Van bahgl pH'sl 9,5 olan
Van Golunun 450 metre derinliginde ya!;iayan bir bahk tUrudur ve bu c;:ah!;imada ilk defa
G6PD enzimi Van Golu ballgl karaciger ve eritrositlerinden safla!;itlnhp karakterize
edilmi!;itir.
Van Golu ballgl eritrosit ve karaciger G6PD enzimleri, amonyum slilfat c;:6ktUrmesi ve 2',5'­
ADP Sepharose 4B afinite kromatografisi ile
safJa~tlnldl.
Van Golli ballgl karaciger G6PD
enzimi % 20,27 verimle 26 .156 kat, eritrosit G6PD enzimi ise % 44,48 verimle 1215 kat
safJa!;itlnldl. Tlim i!;ilemler boyunca slcakhk +4°C'de kontrol altmda tutuldu. Enzim safhgl
SDS-poliakrilamid jel elektroforezi metoduyla kontrol edildi. Jel filtrasyon kromatografisi ve
SDS-poliakrilamid jel elektroforezi metoduyla molekul kutlesi ve alt birim saYllan tayin
edildi. Enzim ic;:in stabil pH, optimum pH 'lar bulundu . Aynca 25°C ve optimum pH'da
Lineweaver-Burk grafikleri yardlmlyla glukoz 6-fosfat ve NADp· ic;:in KM ve Vmax degerleri
hesaplandl. Enzim aktivitesi Beutler metoduna gore 340 nm de spektrofotometrik olarak
belirlendi (2).
19