KimyaKongreleri.org

IV. Ulusal Afinite Teknikleri Kongresi, 4-7 Mayis 2008, Mugla Üniversitesi, Mugla
SozlO-6
ROMATOiD ARTRiT TE~Hisi iC;iN MiKROTEMAS BASKILAMA YONTEMiYLE WZEY PLAZ~ION REZONANS· SENSORLERiN HAZIRLANMASI Erkut Y,lmaz, Lokman Uzun, Serap $enel; Adil Denizli Hacettepe Universitesi. Kimya Boliimii, Ankara Lizozim bUtiin memeli canhlarda bol miktarda bulunan ve vUcudun kendi antibiyotigi olarak
adlandmlan bir proteindir. Lizozim in:.vivo ortamda bakterilerin polisakkarit htiere duvarlan
Uzerindeki asetal gruplarmm paryalanmaSml katalizlediginden do gal bir ilay olarak gorev aItr.
Lizozimin bagtl olarak kii9i.ik yapIst
ye
basitligi onu protein tayininde yeni yontemler
ge1i~tirilmesi
i91n miikemmel bir model analit yapmaktadlf. Yakm zamanda romatoid artritli (RA) hasta
plazmasmda lizozimin
sitrullenmi~
varyantlanna
kar~I olu~turulan
antikorlann varhgl
ke~fedi1mi~tir.
91kannl~hr.
Bu da hastahgm yilksek ozgiillUkte klinik indeksinde kullanlln potansiyelini ortaya
MolekUler basktlamm~ polimerler (MIP'ler), klinik analizler, ttbbi
ta~mlm
te~hisler,
t;evre gorUntiileme ve ilat;
sistemleri gibi bir t;ok alanda kullamm potansiyeline sahiptirler. Molekiiler basktlarna
teknolojisi ile dogal reseptorlerle
kar~lla~tmlabi1ecek
baglanrna sabitine sahip ve yilksek slcakllk,
basmt;, yUksek pH ve organik t;ozUciilere direny" gibi daha sert
ko~ul1arda yah~abilen
sentetik
reseptarler veya molekUller hazlrlamak mUmkUndfu. Mikroternas basktlama yonteml, 3
a~amadan
olu~maktadlr:
monom<~
i) kalIp molekiiliL'1 modifiye
edilmi~
cam slayt uzerine adsorpslyonu; ii)
90zeltisinin cam slayt ile temaSl; iii) fotopolimerizasyon ile polimerik film
olu~umu.
Mikrotemas
basktlama, sadece bUyilk molekUllerin ve protein, kristal gibi molekUl gruplanm tamma azelligine
sahip yilzeylerin iiretiminde kuTIamlmaktadrr. Mikrotemas basktlamaya arnek olan bu yantem, farkll
bile~enlerdeki
MIP'lerin paralel sentezine izin veren hlZh bir yontemdir ve yok az monomer haemi (4
mikrolitre) gerektirmektedir. Bu yontem aynea, molekUler hedeflerin olaSl yazUnUrlUk ve kaItp olarak
ku11amlan proteinlerin konfonnasyonel
degi~im problernlerini
Bu 9ah~mada, mikrotemas basktlama yantemi ile lizozim
altm 9ipleri
hazlr1anml~tIr. <;::ah~mada
ilk
a~3ma
de ortadan kaldlnnaktadlr.
basktlanml~
yilzey plazmon rezonans (SPR)
olarak fonksiyonel monomer N-metakriloil-L-firozin
meril ester (MAT) metakroil klorfu ve L-tirozin meril esterin reaksiyonu ile
a11il merkaptan He modifiye
(OTC) ile modifiye
edi1mi~tir.
edilmi~tir.
iiretilmi~tif.
SPR yipler
Mikrotemas basktlarna i9in cam slayt, oktodesiltrik1orosilan
Modifiye
edilmi~
cam slaytlar, 1.0 mg/mL
deri~imindeki
lizozim
t;ozeltisi iyerisinde gece boyu
bekletilmi~tir.
YUzeyme lizozim adsorplanan cam slaytlar mikrotemas
baskIlama i9in kaltp olarak
kul1amlml~tIr.
MAT, HEMA, EGDMA ve AlliN it;eren monomer
t;ozelrisinden 10 p.L modifiye
edilmi~ SPR
monomer
kan~lml
yip iizerine ilave
edilmi~
ve lizozim adsorplanan cam slayt
iizerine kapatllarak IJV-fotopolimerizasyon ile polimerik film
olu~turulmu~tur.
Cam slayt polimerik film lizerinden slynlarak almml:;l ve dde edilen SPR 9ip etanol ve su iIe
KimyaKongreleri.org
35
Soz10·6
IV. Ulusal Afinite Teknikleri Kongresi, 4-7 Mayis 2008, Mugla Üniversitesi, Mugla
Ylkanarak
temizlenmi~tir.
deri~imdeki
Haztrlanan SPR sensor GenOptics marka SPR cihazma
lizozim 90zeltileri ile kinetik analizleri yapIlml~t1r.
36
KimyaKongreleri.org
baglanml~
ve farkh