AP-TR-011 Polifenolik Bileşiklerin Antioksidan Kapasitelerinin Belirlenmesinde Fiber Optik Sensör Esaslı CUPRAC Yönteminin Geliştirilmesi Esin Kondakçı, Mustafa Bener, Mustafa Özyürek, Kubilay Güçlü, Reşat Apak İstanbul Üniversitesi Mühendislik Fakültesi Kimya Bölümü Analitik Kimya Anabilim Dalı Antioksidanlar oksidatif stres koşulları altında hücreleri ve diğer makro molekülleri ROS türlerinin saldırısına karşı koruyan ve insan sağlığına faydalı olan bileşiklerdir. Organizmadaki antioksidan ve pro- oksidan dengenin bozulması, Alzheimer ve Parkinson gibi çeşitli hastalıkları tetikleyen reaktif oksijen türlerinin (ROS) oluşumuna neden olur. Oluşan reaktif türlerin birikimi canlı hücrelerdeki biyolojik makro moleküllerde (yağ asidleri, lipidler, proteinler ve DNA) onarılamayan hasarlara sebep olurlar [1]. Bu çalışmada gıda örneklerinde toplam antioksidan kapasite tayini için düşük maliyetli ve geniş kullanım alanı bulabilecek reflektans ölçümüne dayanan sensör esaslı- spektrofotometrik yöntem (fiber optik sensör esaslı - CUPRAC (bakır (II) iyonu indirgeme antioksidan kapasite) yöntemi) geliştirilmiştir. Kromojenik oksidasyon aracı olan bakır (II )neokuproin (Cu (II )- Nc) kompleksi katyon değiştirici polimerik bir membran olan nafyon film üzerinde tutturulduktan sonra antioksidan varlığında redoks reaksiyonu sonucunda oluşan Cu (I ) - Nc kelatının reflektans değerlerindeki değişmeler 530 nm’de ölçülmüştür. Çeşitli antioksidan bileşiklerin (bazı flavonoidler, hidroksisinnamik ve hidroksibenzoik asitleri içeren gıda polifenolleri) troloks eşdeğeri antioksidan kapasite (TEAC) değerleri reflektans ölçümüne dayanan fiber optik sensör esaslı- CUPRAC yöntemi ile belirlenerek optik sensör esaslı - CUPRAC yöntemi [2] bulgularıyla karşılaştırılmıştır. Önerilen yöntem için lineerlik, toplamsallık, kesinlik ve geri kazanım parametreleri test edilerek yöntem validasyonu yapılmıştır. Standart antioksidan bileşikler için geliştirilen yöntem bunların sentetik karışım çözeltilerine ve meyve suları gibi daha kompleks matrikslere uygulanmıştır. Morin bileşiğinin molar absorplama katsayısı troloks, kuersetin, kateşin, rutin, kafeik asit ve fisetin bileşiklerinden daha yüksek bulunmuştur. Morin bileşiğinin molar absorplama ka tsayısı, lineer doğru denklemine göre 5.97 x 10 5 L mol-1 cm-1 iken Kubelka- munk doğru denklemine göre 2.96 x 10 5 L mol -1 cm1 ’dir. Çalışılan bileşiklerin TEAC değerleri sırasıyla; morin > kuersetin > rutin > troloks > kafeik asit > fisetin > kateşin şeklindedir. KAYNAKLAR [1] Halliwell, B., Archives of Biochemistry and Biophysics, 476, 107 -112, 2008. [2] Bener, M., Özyürek, M., Güçlü, K., Apak, R., Analytical Chemistry, 82 (10 ), 4252-4258, 2010. 80 KimyaKongreleri.org AP-EN-011 Development of the Fiber Optic Sensor- Based CUPRAC Assay for Determination of Antioxidant Capacity of Polyphenolic Compounds Esin Kondakçı, Mustafa Bener, Mustafa Özyürek, Kubilay Güçlü, Reşat Apak Istanbul University Faculty of Engineering Department of Chemistry Division of Analytical Chemistry Antioxidants are human health beneficial compounds that can protect cells and other macromolecules from the damage of the reactive oxygen species (ROS) under oxidative stress conditions. The imbalance of antioxidant and pro- oxidant in the organism causes ROS species which are induced to various diseases like Alzheimer and Parkinson. Accumulation of reactive species causes irreversible damage on biological macromolecules (e.g., fats, lipids, proteins, and DNA) [1]. In this study, a low - cost and widely applicable sensor- based spectrophotometric method (fiber optic sensor- based ‘cupric reducing antioxidant capacity’ (CUPRAC) method) by measuring reflectance was developed for the total assay of antioxidants in foodstuffs. The chromogenic oxidizing reagent, copper (II )- neocuproine (Cu (II )- Nc) complex, was immobilized onto a cation- exchanger film of Nafion, and the reflectance changes associated with the formation of the highlycoloured Cu (I )- Nc chelate as a result of reaction with antioxidants was measured at 530 nm. The trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) values of various antioxidants (dietary polyphenols including flavonoids, hydroxycinnamic and hydroxybenzoic acids) using the fiber optic sensor- based CUPRAC assay was compared to those of the optic sensor based - CUPRAC assay [2]. The proposed assay were validated through linearity, additivity, precision and recovery. The test developed for single standard compounds was applied to their synthetic mixtures, then to more complex matrixes. Morin had higher molar absorption coefficient than trolox, quercetin, catechin, rutin, caffeic acid, and fisetin. The molar absorption coefficients of morin were 5,97 x 105 L mol -1 cm-1 to linear equation while 2,96 x 10 5 L mol -1 cm-1 to Kubelka-munk equation. The TEAC values of antioxidants were morin > quercetin > rutin > trolox > caffeic acid > fisetin > catechin, respectively. REFERENCES [1] Halliwell, B., Archives of Biochemistry and Biophysics, 476, 107 -112, 2008. [2] Bener, M., Özyürek, M., Güçlü, K., Apak, R., Analytical Chemistry, 82 (10 ), 4252-4258, 2010. 81 KimyaKongreleri.org