CE00007 Versiyon 2 07/2015 Sayfa 1/2

Anti – İnsan TOP2A
Fare Monoklonal Primer Antikor
Klon: UMAB145
IVD
REF CE00007
KATALOG NO
C0007MA01-MA
C0007MA05-MA
C0007MA10-MA
0.1 mL
0.5 mL
1.0 mL
TÜRKÇE
Kullanım Amacı
Anti-insan TOP2A (Klon: UMAB145) Fare Monoklonal Primer Antikor donmuş veya formalin fikse insan dokularında ve hücrelerinde DNA
topoizomeraz 2-alfa ekspresyonunun laboratuvarda immünohistokimya yoluyla tespitinde kullanılır. Pozitif boyanmanın veya boyanma
olmamasının klinik yorumlaması doğru kontrollerin kullanıldığı morfolojik ve histolojik incelemeler ile desteklenmelidir. Değerlendirmeler
hastanın klinik hikayesi ve yetkin bir patoloğun yaptığı diğer tanı testleri ile birlikte yapılmalıdır. Bu antikor vücut dışı tanı (IVD) amacıyla
kullanılır.
Genel Bilgi
DNA topoizomeraz II-alfa (gen adı: TOP2A) transkripsiyon sırasında DNA’nın topolojik durumunu kontrol eden ve değiştiren bir enzimdir. Bu
çekirdek enzimi kromozom yoğunlaşması, kromatid ayrılması ve transkripsiyon ve replikasyon sırasında meydana gelen bükülme stresinin
azaltılması gibi süreçlerde yer alır. Dupleks DNA’nın iki sarmalının ayrılmasını ve birleşmesini katalizleyerek sarmalların birbiri üzerinden
geçmesini, böylece de DNA’nın topolojisinin değişmesini sağlar. Bu enzimin muhtemelen bir gen duplikasyon olayının ürünleri olan iki formu
bulunur. Çeşitli mutasyonlar ilaç direnci gelişmesi ile ilişkilendirilmiştir. Bu enzimin düşük aktivitesi ataxiatelangiectasia’da rol oynayabilir.
Diğer isimler: TOP2, TP2A
Ürün Bilgisi
Anti-insan TOP2A Fare Monoklonal Primer Antikor (Klon: UMAB145) 20mM Sodyum fosfat, 150mM Sodyum klorür, %0.2 BSA, %0.09
Sodyum azid ile birlikte pH 7.4 sıvı formda sunulur. Antikorun izotipi IgG1’dir. Protein konsantrasyonu yaklaşık 0.6 mg/ml’dir (+/- 0.05
mg/ml).
Bu primer antikor immünohistokimyada formalin-fikse parafine-gömülü insan dokuları için, kullanılan görüntüleme sistemine bağlı olarak
1:100 – 1:200 dilüsyonda kullanılabilir. Bu yalnızca başlangıç için öneridir ve en uygun dilüsyon oranı laboratuvar tarafından belirlenmelidir.
İmmünojen
İnsan TOP2A proteininin 1100-1531 amino asitlerine denk gelen, E. coli’de üretilmiş insan rekombinant protein fragmenti (NP_001058).
Spesifiklik
Anti-insan TOP2A Fare Monoklonal Primer Antikorun spesifikliği normal insan böbreğinde ve insan kolon kanserinde belirlenmiştir.
İmmünohistokimya (IHC) test yöntemlerinde Anti-TOP2A antikoru, normal insan böbreğinde boyanma göstermemiş, insan kolon kanseri
dokusunda pozitif boyanma göstermiştir.
Gerekli Diğer Malzemeler
Antikor dilüenti, Antijen açma (HIER) solüsyonu, Antikor görüntüleme kitleri, Kromojen, Boyama reaktifleri, negatif ve pozitif kontrol dokusu
lamları.
Önlemler
1. Yalnızca eğitimli personel kullanabilir.
2. Bu ürünün içinde saf halindeyken çok toksik olan Sodyum Azid (NaN3) vardır. NaN3’in bu üründe bulunan konsantrasyonu tehlikeli
olarak sınıflandırılmadığı halde kurşun veya bakır boru tesisatı ile reaksiyona girerek son derece patlayıcı olan metal azid birikimleri
oluşturabilir. Boru tesisatında metal azidlerin birikmesini önlemek için atık ürünü döktükten sonra ardından bol su dökün.
3. Gözler ve cilt ile temasından sakınmak için uygun kişisel korunma giysileri kullanın.
4. Kullanılmayan reaktifler yerel ve ulusal düzenlemelere uygun olarak atılmalıdır.
Saklama
2-8°C’de saklayın. Ürünü etiketinin üzerinde belirtilen son kullanma tarihinden sonra kullanmayın. Reaktifler belirtilenden farklı koşullarda
saklanırsa bu koşulların uygun olup olmadığını kullanıcısı doğrulamalıdır. Saklanan ürünün stabilitesinin kaybolduğunu belli eden bir gösterge
yoktur, bu yüzden hasta örnekleri çalışılırken aynı zamanda pozitif ve negatif kontroller de çalışılmalıdır.
Örneklerin Hazırlaması
Parafin kesitler
Anti-insan TOP2A Fare Monoklonal Primer Antikor formalin-fikse, parafine-gömülü doku kesitlerinde 1:100 – 1:200 dilüsyonda kullanılabilir.
Anti-insan TOP2A Fare Monoklonal Primer Antikorun (Klon: UMAB145) boyama yapması için Isı Yoluyla Epitop Açma (HIER) solüsyonu ile 20
dakika ön işlem yapılması gerekir. Bu işlemde GBI Labs ürünü olan Accel HIER pH 8.5 solüsyonunun kullanılmasını öneririz. Bu solüsyon ile
işlem yapıldığında 1:200 dilüsyondaki antikor insan kolon kanserinde optimal boyanma göstermiş, normal insan böbreğinde boyanma
göstermemiştir. Dilüsyon oranları yaklaşık tahminlerdir ve boyanma sonuçları kullanılan reaktiflere ve görüntüleme protokollerine göre
farklılık gösterebilir. Antikorun performansının ve uygun protokolün doğrulanması kullanıcının sorumluluğundadır.
CE00007
Versiyon 2
07/2015
Sayfa 1/2
Boyama Prosedürü
Manuel Boyama Prosedürü
1. Lamları deparafinize edin.
2. Lamları yaklaşık 10 dakika süreyle %3’lük peroksidaz bloklama solüsyonunda tutun ve ardından her biri 2 dakika olmak üzere
distile suyla 2 kez yıkayın.
3. Bu antikor için Isı Yoluyla Epitop Açma işlemi gereklidir. Accel pH 8.5 HIER Buffer (GBI Labs B22C100) solüsyonunun kullanılmasını
öneririz.
4. Boyamaya geçmeden önce PBS ile her biri 2 dakikadan 3 kez yıkayın.
5. Primer antikoru uygulayın ve oda sıcaklığında 30-60 dakika inkübe edin. İnkübasyondan sonra PBS-T ile her biri 2 dakika olmak
üzere 3 kez yıkama yapın.
6. Sekonder antikoru uygulayın ve görüntüleme sisteminin kullanma talimatında belirtilen şekilde inkübe edin. PBS-T ile her biri 2
dakika olmak üzere 3 kez yıkama yapın.
7. Enzim konjugatı uygulayın ve görüntüleme sisteminin kullanma talimatında belirtilen şekilde inkübe edin. PBS-T ile her biri 2 dakika
olmak üzere 3 kez yıkama yapın.
8. Kromojeni uygulayın ve 5-10 dakika inkübe edin, ardından distile su ile yıkayın.
Boyanmanın Yorumlanması
Anti-insan TOP2A Fare Monoklonal Primer Antikorun hücredeki boyaması çekirdekte meydana gelir.
Performans Özellikleri
Normal dokularda/hücrelerde beklenen boyanma
Normal insan böbreğinin bu antikor için negatif olduğu gösterilmiştir.
Anti-insan TOP2A Fare Monoklonal Primer Antikoru (Klon: UMAB145) insan kolon kanserinde hücre çekirdeğinde boyanma oluşturmuştur.
İletişim Bilgisi
SDIX LLC
111 Pencader Drive Newark, Delaware 19702 USA
+1 302 456 6789 +1 800 544 8881(USA) www.SDIX.com
Türkiye Temsilcisi
Novogen Diagnostik Laboratuar ve Sağlık Hizmetleri San. ve Tic. Ltd. Şti.
Mimar Sinan Mah. Üsküdar Cad. No:1 Yedpa Ticaret Merkezi, E Cad. No: 3 Ataşehir / İstanbul
Tel: 0216 457 93 33 Faks: 0216 457 93 44 info@novogen.com.tr
CE00007
Versiyon 2
07/2015
Sayfa 2/2