CMV EBV HHV6 Quant Real TM CE

In Vıtro Tanısal Kullanım için
Sadece Profesyonel Kullanım
için
CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
EL KİTABI
Sitomegalovirüs (CMV), Epstein Barr Virus (EBV) ve İnsan
Herpes 6 Virus (HHV6)’ün Tespit ve Farklılaşması için
Multipleks Real Time PCR Kiti
REF V48-100FRT
100
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
İSİM
CMV/EBV/HHV6 Quant Real - TM
KULLANIM AMACI
CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM biyolojik materyalde Sitomegalovirüs(CMV), Epstein Barr
Virus (EBV) ve İnsan Herpes 6 Virüsün, (HHV6) kantitatif algılama ve farklılaşması için RealTime Amplifikasyon "testidir. DNA örneklerden ekstrakte edilir, CMV/EBV/HHV6 ve İç Kontrol
(IC) için floresan boya prob spesifik ile real time kullanılarak amplifiye edilir. Test PCR analizi
aşamasını, materiyal örneklemesini ve saklama koşullarını kontrol eden bir İç kontrol (globin
geni) içerir.
PCR TESPİTİNİN PRENSİBİ
CMV, EBV ve HHV6’nin hibridizasyon- floresans ile PCR ile tespiti, DNA’nın klinik örnekten
ekstraksiyonunu ve patojen genomunun spesifik bölgelerinin amplifikasyonunu içerir. Klinik
materyalden DNA’nın ekstraksiyonu sırasında, insan genomik DNA’sı (endojen İç Kontrol)
amplifiye olur. Endojen iç kontrol (IC Glob) PCR analiz aşamalarını, materyla örneklemesini ve
saklama koşullarını kontrol eder. Ardından elde edilen örnekler spesifik primerler ve Polimeraz
(TaqF) amplifiye edilir. Real-time PCR’da amplifiye ürünler floresans boyalar kullanılarak tespit
edilir.
Bu boyalar, amplifiye ürüne spesifik olarak bağlanan oligonükleotit problara bağlanır. Floresans
şiddetin real-time PCR süresince gerçek zamanlı görüntülenmesi reaksiyon tüplerinin PCR
çalışmasının ardından tekrar açılmasına gerek kalmadan biriken ürünleri tespit eder.
SAĞLANAN MATERYALLER
Açıklama
Volume, ml
Quantity
renksiz berrak sıvı
0.6
2 tüp
PCR-mix-2-FRT
renksiz berrak sıvı
0.3
2 tüp
Polimeraz (TaqF)
renksiz berrak sıvı
0.03
2 tüp
RNA-tamponu
renksiz berrak sıvı
0.6
1 tüp
DNA kalibratör КSG1
renksiz berrak sıvı
0.2
1 tüp
DNA kalibratör КSG2
renksiz berrak sıvı
0.2
1 tüp
Negatif Kontrol (C-)*
renksiz berrak sıvı
1.2
2 tüp
Pozitif Kontrol DNA EBV / CMV / HHV-6 ve insan DNA**
renksiz berrak sıvı
0.1
2 tüp
Reaktifler
PCR-mix-1-FRT EBV / CMV / HHV-6 / Glob
* Ekstraksiyon prosedüründe Ekstraksiyon Negatif Kontrolü olarak kullanılmalıdır.
* Ekstraksiyon prosedüründe Ekstraksiyon Pozitif Kontrolü olarak kullanılmalıdır.
(PCE).
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
GEREKLİ AMA VERİLMEYEN MATERYALLER
DNA ekstraksiyon kit.
Tek kullanımlık tozsuz eldiven ve laboratuvar önlüğü.
Pipetler (ayarlanabilir).
Aerosol bariyerli steril pipet uçları ( up to 200 µl).
Tüp rakları.
Vortex karıştırıcı.
2 mllik reaksiyon tüpleri için masaüstü rotorlu santrifüj. PCR
kutusu.
Real Time PCR termocycler (Rotor-Gene 3000 or Rotor-Gene 6000 (Corbett Research,);
Rotor-Gene Q (Qiagen) iQ5 and iCycler iQ (Bio-Rad), Mx3000P (Stratagene).
PCR veya PCR-plaka için polipropilen mikrotüp.
2-8 ° C için buzdolabı.
≤ -16 ° C için derin dondurucu.
Kullanılan pipet uçları için atık kutusu.
DEPOLAMA TALİMATLARI
CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM PCR kitinin bütün bileşenleri (Polimeraz taqF, PCR-mix-1FRT EBV / CMV / HHV-6 / Glob, PCR-mix-2-FRT hariç) 2-8 °C’de saklanmalıdır. Kit 2-8 ° C de
sevk edilebilir ama alındığında -20 ° C’de saklanmalıdır. Aksi belirtilmediği sürece, reaktiflerin ilk
kullanımdan önce ve sonraki raf ömrü aynıdır.
KARARLILIK
CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM Test kit etiketinde belirtilen son kullanma tarihine kadar
kararlıdır. Ürün, etiketin üzerinde belirtilen kontrol tarihine kadar işlemeye devam edecektir.
Işık, ısı ve neme maruz kalmak bazı kit bileşenlerini etkileyebilir. Bu durumdan kaçınılmalıdır.
Reaktiflerin sürekli dondurulup-çözülmesinden kaçınılmalıdır. Bu durum reaktiflerin hassasiyetine
zarar verebilir. Etiketinin üzerinde bulunan talimatlara uygun saklanmayan reaktiflerin
performansı etkilenebilir ve bu durum test sonuçlarını ileri derecede etkileyebilir.
UYARI VE ÖNLEMLER
In Vitro Tasıl Tıbbi Cihaz
Sadece In Vitro Tanısal kullanım
1. Numuneler e reaktifler ile çalışırken tek kullanımlık eldiven ve göz koruması kullanın
laboratuvar önlüğü giyin. Sonrasında ellerinizi güzelce yıkayın.
2. Ağızla pipetleme yapmayın.
3. Çalışma alannda yemek yemeyin, sıvı tüketmeyin, sigara içmeyin, makyaj yapmayın veya
kontak lenslerinizi çıkarıp-takmayın.
4. Son kullanma tarihinden sonra bir kiti kullanmayın.
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
5. Tüm örnekler ve kullanılmayan reaktifleri yerel düzenlemelere uygun olarak atın.
6. Biyogüvenlik Seviyesi 2, bulaşıcı maddeler içeren veya içerdiğinden şüphelenilen malzemeler
için kullanılmalıdır.
7. % 0,5 'lik sodyum hipoklorit ya da diğer uygun bir dezenfektan kullanılarak bütün numune
veya reaktiflerin tüm döküntülerini temizleyin ve dezenfekte edin.
8. Deri, göz ve mukozanın örnek ve reaktiflerle temasından kaçının. Eğer özelti temas ederse, su
ile yıkayınız ve hemen bir doktora başvurun.
9. Malzeme Güvenlik Bilgi Formları (MSDS) istek üzerine sağlanır.
10. Bu ürünün kullanımı DNA amplifikasyonunda eğitilmiş personel ile sınırlı olmalıdır.
11. PCR reaksiyonları kontaminasyona karşı hassastır. Iyi laboratuvar uygulamaları uyarınca
laboratuvarda kontaminasyon riskini en aza indirmek için PCR sürecindaki uygulamaların fiziksel
ayrımı gereklidir.
12. Labarotuvardaki çalışma akışı tek yönlü işlemelidir. Ekstraksiyon alanında başlamalı PCR ve
ardından tespit alanına doğru devam etmelidir. Önceki basamakların gerçekleştirildiği alanlara
örnek, ekipman ve reaktif taşımayın.
Kitin bazı bileşenleri koruyucu olarak Sodyum azid içerir. Reaktifin taşınması
sırasında metal tubing kullanmayın.
PCR analizi, nakliye ve depolama için biyolojik maddelerin örneklemesi üreticinin
el kitabında ayrıntılı olarak tarif edilmiştir. Bu el kitabının işin başlamadan önce okunması
tavsiye edilir.
KALİTE KONTROL
Sacace’s ISO 13485-Certified Kalite Yönetim Sistemi uyarınca, her lot tutarlı ürün kalitesini
sağlamak için önceden belirlenmiş özellikleri karşı test edilir.
ÖRNEKLERİN TOPLANMASI, SAKLANMASI VE TAŞINMASI
CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM aşağıdaki materyallerden ekstrakte edilen DNA’lar ile
kullanılabilir:
ACD veya EDTA tüplerinde toplanan tüm periferik ve göbek kordon kanı;
buffy coat;
Doku mekanik homojenizatör ile homojenize edildi ve steril PBS içinde çözüldü;
idrar (sediment);
sürüntü: fırçayı nükleazsız 1,5 ml tüpe koyun ve 0,2 mL transfer ortamı ekleyin. Ortamın
içerisindeki fırçayı 15-20 saniye şiddetle sallayın.
Örnekler 2–8 °C’de 24 saatten uzun süreli olmamak şartıyla daha uzun süreli saklamak için –20/80
°C’de dondurun. Klinik örneklerin,etyolojik ajanların taşınması için ulaştırma ülke, federal, eyalet
ve yerel yönetmeliklere uygun olmalıdır.
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
DNA İZOLASYONU
Aşağıdaki kitler önerilir:
 DNA-Sorb-B (Sacace, REF K-1-1/B)
 DNA/RNA-Prep (Sacace, REF K-2-9)
Ekstraksiyonunu üreticinin talimatlarına uygun olarak gerçekleştiriniz.
DNA C– ile işaretli tüpe 100 µl Negatif Kontrol koyun. PCE ile işaretli tüpe 90 µl
Negatif Kontrol ve 10 µl Pozitif Kontrol DNA EBV / CMV / HHV-6 ve insan
ekleyin.
PROTOKOL (Reaksiyon hacmi 25 µl):
1.
Steril tüpte her örnek için 10*N µl PCR-mix-1 “CMV/EBV/HHV6/IC”, 5,0*N
PCR-Buffer-FRT ve 0,5*N TaqF DNA Polimeraz hazırlayın. Vorteksleyin ve 2-3 sn santrifüj
edin.
2.
Örnek ve kontroller için gerekli sayıda tüp hazırlayın ve herbirine 15 µl Reaksiyon Mix ve 10
µl ekstrakte DNA örneği ekleyin. Pipetajla karıştırın.
(Ekstrakte edilmiş DNA içeren tüpleri 2 dakika maksimum hızda (12000-16000 g) santrifüj edin ve
süpernatantı dikkatli alın. N.B. pelleti dağıtmayın. Sorbent reaksiyonu inhibe eder!).
3.
Nitel analiz için:
NCA
NCA (Amplifikasyonun Negatif Kontrolü) etiketli tübe - 10 µl RNA-buffer ekleyin.
C+
C+ (Amplifikasyonun Pozitif Kontrolü ) etiketli tüpe - 10 µl DNA kalibratör КSG2
ekleyin.
4.
Nicel analiz için:
NCA
Kalibratörler
КSG1 ve КSG2
NCA (Amplifikasyonun Negatif Kontrolü) etiketli tüpe - 10 µl RNA-buffer ekleyin.
İki tüpe 10 µl КSG1 ekleyin ve diğer iki tüpe 10 µl КSG2 ekleyin.
Tüpleri kapatın ve cihaza şu sıra ile yerleştirin: örnekler, Negatif Kontroller, pozitif Kontroller,
Standartlar.
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
Rotor-tip cihazlar için amplifikasyon programı1
Basamaklar
Sıcaklık, °С
Süre
Floresans tespit
Döngü
Hold
95
95
60
72
95
15 dak
5s
20 s
15 s
5s
1
60
20 s
72
15 s
–
–
–
–
–
FAM/Green, JOE/Yellow,
ROX/Orange
–
Döngü 1
Döngü 2
5
40
plate-tip ve modüler tip cihazlar için amplifikasyon programı2
Basamaklar
Sıcaklık, °С
Süre
Floresans tespit
Döngü
1
95
95
60
72
95
15 dak
5s
20 s
15 s
5s
1
60
30 s
–
–
–
–
–
FAM, JOE/HEX/Cy3,
ROX/TexasRed, Cy5
72
15 s
2
3
5
40
–
1 Örneğin Rotor-Gene™ 6000/Q (Qiagen)
2 Örneğin iQ5™ (BioRad); Mx3005P™ (Agilent Technologies), ABI® 7500 Real Time PCR
(Applied
Biosystems), SmartCycler® (Cepheid)
SONUÇ ANALİZİ
β-Globin gen DNA (IC) , FAM/Green kanalında, EBV DNA , JOE/HEX/Cy3/Yellow
kanalında, CMV DNA , ROX/TexasRed/Orange kanalında, veHHV6 DNA , Cy5/Red kanalında
tespit edilir.
Sonuçların yorumlanması
Sonuçlar eşik hattı ile floresan eğrisinin çakışmasına göre (ya da çakışmamasına ) cihazın yazılımı
tarafından yorumlanır.
1. EBV DNA örneğinin pozitif kabul edilmesi için:
JOE/HEX/Cy3/Yellow kanalındaki sistem sonuçlarında Ct değeri tespit edilmeli ve pozitif
sonuçların eşik değerini aşmamalı.
2. CMV DNA örneğinin pozitif kabul edilmesi için:
ROX/Orange/TexasRed kanalındaki sistem sonuçlarında Ct değeri tespit edilmeli ve pozitif
sonuçların eşik değerini aşmamalı.
3. HHV6 DNA örneğinin pozitif kabul edilmesi için:
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
Cy5/Red kanalındaki sistem sonuçlarında Ct değeri tespit edilmeli ve pozitif sonuçların eşik değerini
aşmamalı.
4. Kalitatif analiz için, örneğin negatif kabul edilmesi için:
FAM/Green kanalındaki sistem sonuçlarında Ct değeri ürün bilgi formundaki değeri aşmamalıdır.
5. Kantitatif analiz için, IC Glob DNA miktarı tam kan, beyaz kan hücresi ve iç organ biyopsisi
için 2000 kopya/reaksiyondan, tükürük ve oropharyngeal sürüntü için 500 kopya/reaksiyondan
fazla olmalı.
FAM/Green kanalı sistem tablosunda Beyin omurilik sıvısı için (liquor), Ct
değeri , Ürün Veri Kartında belirtilen Ct değerinden yüksek olabilir veya kantitatif
analiz halinde beyin omurilik sıvısı örnekleri çok az sayıda hücre içerdiğinden IC
Glob DNA miktarı reaksiyon başına 500 kopyadan az olabilir.
6. Kalitatif analiz için, JOE/HEX/Yellow, ROX/Orange, veya Cy5/Red kanalında sonuç
sisteminde Ct değeri tespit edilemez veya eşik değerinden yüksek bir değerde olursa ve FAM/Green
kanalında sonuç sisteminde tespit edilen Ct değeri Ürün Veri Formunda belirtilen değeri aşarsa
analizin sonuçları geçersiz sayılır.
7. Kalitatif analiz için, JOE/HEX/Yellow, ROX/Orange, veya Cy5/Red kanalında sonuç
sisteminde Ct değeri tespit edilemez veya eşik değerinden yüksek bir değerde olursa ve IC Glob
DNA miktarı reaksiyon başına tam kan, beyaz kan hücresi, iç organ biyopsi materyali için 200
kopyadan az ise veya tükürük ve oropharyngeal sürüntü için 500 kopyadan az ise, analizin sonuçları
geçersiz sayılır. Örneklerin PCR analizi tekrarlanmalıdır.
8. Kalitatif analiz için, analizin sonuçları sadece amplifikasyon için hem pozitif hem negatif
kontroller ve ekstraksiyon negatif kontrol doğru ise güvenilir sayılır. Kantitatif analiz için, C+ ‘daki
sonuçlar bu ürünün bilgi formunda belirtilen aralıkta olmalıdır.
Tablo. 1. Kontrol sonuçları
Kontrol Kontrol yeri
Kanallarda Ct
FAM/Green JOE/HEX/
Cy3/Yellow
ROX/Orange/
TexasRed
Cy5/Red
Yorumlama
Neg
Neg
Neg
OK
NCA
DNA
Neg
ekstraksiyonu, PCR
PCR
Neg
Neg
Neg
Neg
OK
C+
PCR
POZ
POZ
POZ
POZ
OK
PCR
Poz
Poz
(Bilgi formuna (Bilgi formuna
bkz)
bkz)
Poz
(Bilgi formuna
bkz)
Poz
(Bilgi formuna OK
bkz)
NCE
QS1
QS2
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
Kantitatif Sonuçlar
Kantitatif analizlerde, toplam DNA İnsan bütün kanı, beyaz kan hücreleri ve biyopsi malzemeden
ekstrakte edildi ise , kontrol ve test örneklerinde standart hücre miktarı başına DNA KOPYA (105)
bir log konsantrasyonu aşağıdaki formülle hesaplanır:
CMV için:
log { PCR örneğindeCMV DNA kopyaları x 2*105}= log {CMV DNA kopya/105 hücre}.
Glob DNA kopyaları PCR örneğinde
EBV için:
log { PCR örneğindeEBV DNA kopyaları x 2*105}= log { EBV DNA kopya/105 hücre}.
Glob DNA kopyaları PCR örneğinde
HHV6 için:
log { PCR örneğindeHHV6 DNA kopyaları x 2*105}= log { HHV6 DNA kopya/105 hücre}.
Glob DNA kopyaları PCR örneğinde
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
Sonuçlar manuel olarak veya excel tablosu kullanılarak hesaplanabilir. Bunu yapmak için örneklerin
siimlerini ilk sütuna (Sütun A) yerleştirin. Joe(Yellow)/HEX/Cy3 kanalından EBV DNA
konsantrasyonlarını kopyalayın ve Excel tablosunun ikinci sütununa yapıştırın ( Sütun B).
Fam(Green) kanalından IC Glob konsantrasyonlarını kopyalayın ve üçüncü sütuna yapıştırın ( Sütun
C). D sütununa şu formülü girin D=LOG (B/C*200000): log değerleri belirecektir.
isim
A
1
2
3
4
5
QS1
QS1
QS2
QS2
Neg PCR
Calc Conc
(kopya/reaksiyon
B
8742
253
648
9962
10011
98
102
Calc Conc
(kopya/reaksiy
C
125640
87787
65765
16354
76865
9793
10143
103
97
log EBV/105
D
4,1
2,8
3,9
CMV (ROX/Orange/TexasRed kanal) ve HHV6 (Cy5/Red kanal) hesaplamasını aynı prosedürü
kullanarak log miktarını sütun B’ye ilgili sonuçları yerleştirerek bulun.
Toplam DNA tükürük, orofaringeal sürüntü ve beyin-omurilik sıvısından (likör) elde edilir ise ml
örnek başına düşen (Conc DNA) DNA konsantrasyonu aşağıdaki formül ile hesaplanır:
Conc DNA = C DNA х 100 (kopya/ml)
C DNA EBV DNA kopya sayısı veya CMV DNA kopya sayısı veya HHV6 DNA kopya sayısı DNA
örneği
Tablo 2. Nitel Analiz
örneği
Ct limit
No.
Açıklama
IC
EBV
28
35
35
Joe
(EBV)
Ct
Rox
(CMV)
Ct
Fam (IC)
1
2
3
4
İsim
344
445
451
456
Ct
27,18
26,41
29,81
23,3
5
461
29,02
6
7
8
9
10
11
472
477
489
491
494
497
24,83
17,51
21,32
23,47
29,88
16,29
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
CMV
34,12
28,48
HHV6
35
Cy5 (HHV6)
Ct
28
32,1
27,7
35,08
33,28
24,06
21,85
28,15
34,95
27,2
31,06
34,18
Sonuç
HHV6
CMV, HHV6
Geçersiz
EBV, HHV6
Geçersiz-?,
(low CMV)
EBV
EBV, HHV6
EBV, HHV6
EBV
Geçersiz
EBV, HHV6
EBV
CMV
HHV6
?
+
?
+
+
?
+
?
low
+
?
+
+
+
+
?
?
+
+
?
+
-
+
VER 10.11.11
12
13
14
15
16
17
18
501
C+
C+
C+
C- (Neg. Control)
C- (DNA-buffer)
C- (DNA-buffer)
18,5
27,23
26,06
26,37
30,18
30,45
30,8
32,64
28,47
27,95
28,17
27,25
26,58
26,73
CMV
OK
OK
OK
OK
OK
OK
-
+
-
KALİTE KONTROL PROSEDÜRÜ
Her örneğin ekstraksiyon prosesini kontrol etmek ve olası reaksiyon inhibasyonlarını belirlemek
için örnek hazırlığının başında belirlenmiş miktar Internal Kontrol (IC) her örneğe ve kontrole
katılır. Örnek hazırlığını, Amplifikasyonu ve tespit basamaklarının doğru şekilde işlendiğinin
doğrulanması için ekstraksiyonun Negatif Kontrolü (NCE), Negatif Amplifikasyon Kontrol (NCA),
pozitif Amplifikasyon Kontrol (C+) gereklidir. Kontroller beklenen aralığın dışında ise (Kontroller
için sonuçlar tablosuna bkz) , bu çalışmada kullanılan bütün örnekler ve kontroller örnek hazırlık
aşamasından başlanarak tekrarlanmalıdır.
SORUN GİDERİLMESİ
Analiz sonuçları aşağıdaki durumlarda dikkate alınmaz:
1.
JOE/Yellow/HEX, FAM/Green, ROX/Orange and Cy5/Red kanallarında Amplifikasyonun
Negatif Kontrolü (NCA) ve Ekstraksiyonun Negatif Kontrolü (C-) için sonuç sisteminde herhangi
bir CT değerinin bulunması reaktifler veya örneklerde kontaminasyonu olduğunu gösterir. Bu
durumda, PCR analizi patojen ve DNA ekstraksiyon aşamasından başlayarak tespit edildiği tüm
numuneler için tekrarlanmalıdır.
2.
Kalitatif analiz için, JOE/Yellow/HEX, FAM/Green, ROX/Orange, veya Cy5/Red
kanallarında PCR’ın Pozitif Kontrol sonuç sisteminde Ct değeri yok ise, patojen DNAsının tespit
edilemediği bütün örnekler için amplifikasyonu tekrarlamak gerekmektedir.
3. Eğer örnek için Ct değeri JOE/Yellow/HEX/Cy3, ROX/Orange/TexasRed, Cy5/Red kanalında
tespit edilmezse veya Veri Formunda belirtilen sınır Ct değerini aşıyorsa ve FAM/Green kanalında
örnek için Ct değeri IC için maximum Ct değerinden yüksekse, analiz DNA ekstraksiyon
aşamasından başlanılarak tekrar edilmelidir. Bu hata, klinik materyallere yanlış muameleden ötürü
DNA kaybından veya PCR inhibitörü varlığından kaynaklanıyor olabilir.
4. Eğer JOE/Yellow/HEX/Cy3, ROX/Orange/TexasRed or Cy5/Red kanalında örnek için tespit
edilen Ct değeri Veri Formunda belirtilen sınır Ct değerinden yüksek ise sonuç belirsiz olarak kabul
edilir. Bu örneklerin çift halinde analiz edilmesi gerekir. Eğer tekrarlanabilir Ct değeri elde edilirse,
sonuç pozitif sayılır; aksi durumda, sonuç belirsiz sayılmalıdır.
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
PERFORMANS ÖZELLİKLERİ
Hassasiyet
CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM PCR kitinin analitik hassasiyeti aşağıdaki tabloda verilmiştir;
Klinik materyalin tipi
Nükleik asit
ekstraksiyonu kit
Beyin omurilik sıvısı (likör), tükürük,
orofaringeal sürüntü ve lavaj
DNA/RNA-Prep
Bütün insan kanı, beyaz kan hücreleri, iç
organlar biyopsi
DNA/RNA-Prep
Hassasiyet
400 kopya/ml
5 DNA kopya per 105
hücre
Özgünlük
CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM PCR kiti Epstein-Barr virus (EBV) DNA, İnsan Herpes
Virus type 6 (HHV6) DNA ve insan sitomegalovirüs (CMV) DNA DNA’sı tespiti için kullanılır.
CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM PCR kiti spesifik aktivitesi, CMV referans suşu AD 169
Epstein- Barr virus için QCMD panel ve amplifikasyon fragmanlarının diziliminden elde edilen
sonuçlar ile onaylanır. Diğer virülerin DNA’sı (herpes simplex virus types 1 and 2, insan herpes
virus type 8, Varicella Zoster Virus, Parvovirus B19 ve diğerleri) ve bakteriyel patojenler
(Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogene, Streptococcus agalactiae, ve diğerleri), ile ilgili
olarak PCR kit içeriğinin aktivite göstermez.
Hedef bölge : CMV – MIE, EBV – LMP, HHV6 –
pol gen
REFERANSLAR
PCR detection of cytomegalovirus DNA in serum as a diagnostic test for congenital
cytomegalovirus infection. C T Nelson, A S Istas, M K Wilkerson, and G J Demmler. J Clin
Microbiol. 1995 December;
33(12): 3317–3318.
Detection of Cytomegalovirus DNA in Peripheral Blood of Patients Infected with İnsan
Immunodeficiency Virus. D. Shibata, W. John Martin, Maria D. Appleman, Dennis M. Causey, J.
M. Leedom, N. Arnheim. J Infect Dis. (1988) 158 (6): 1185-1192.
Multiplex PCR for six herpesviruses after hematopoietic stem cell transplantation. Sawada A,
Koyama-Sato
M, Yasui M, Kondo O, Ishihara T, Takeshita Y, Okamura T, Nishikawa M, Inoue M, Kawa
Pediatr Int.
2011 Aug 2. doi: 10.1111/j.1442-200X.2011.03437.
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
Cytomegalovirus Infections in Non-immunocompromised and Immunocompromised Patients
in the
Intensive Care Unit. Florescu DF, Kalil AC. Infect Disord Drug Targets. 2011
Jun 16.
Comparison of PCR, Antigenemia Assay, and Rapid Blood Culture for Detection and Prevention
of Cytomegalovirus Disease after Lung Transplantation. Adriana Weinberg, Tony N. Hodges,
Shaobing Li, Guanyung Cai, M. R. Zamora. Journal of Clinical Microbiology, February 2000, p.
768-772, Vol. 38, No. 2
Optimization of Quantitative Detection of Cytomegalovirus DNA in Plasma by Real-Time PCR.
Michael Boeckh, MeeiLi Huang, James Ferrenberg, Terry Stevens-Ayers, Laurence Stensland, W.
Garrett Nichols, and Lawrence Corey. Journal of Clinical Microbiology, March 2004, p. 11421148, Vol. 42, No. 3
Quantification of İnsan Cytomegalovirus DNA by Real-Time PCR. Elyanne Gault,Yanne Michel,
Axelle
Dehée, Chahrazed Belabani, Jean-Claude Nicolas, Antoine Garbarg-Chenon. J Clin
Microbiol. 2001
February; 39(2): 772–775
Definitions of Cytomegalovirus Infection and Disease in Transplant Recipients. Per Ljungman,
Paul
Griffiths, Carlos Paya, …Clin Infect Dis. (2002) 34 (8): 10941097
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
KULLANILAN SEMBOLLER İÇİN ANAHTAR
Liste Numarası
Dikkat!
Lot Numarası
<n> test için yeterli içerik
In Vitro Tanısal Kullanım için
Versiyon
Saklama Koşulları
NCA
Negatif Kontrol
Amplifikasyon
Negatif Kontrol
Üretici
C–
Kullanım Klavuzuna bkz
C+
Son Kullanma Tarihi
IC
Ekstraksiyon
Pozitif Kontrol
Amplifikasyon
İç Kontrol
*iQ5™ ,Bio-Rad Laboratories’in ticari markasıdır.
* Rotor-Gene™ Technology ,Qiagene’in ticari markasıdır.
* MX3005P® ,Agilent Technologies’in ticari markasıdır.
*ABI® ,Applied Biosystems’in ticari markasıdır.
* SmartCycler® ,Cepheid’in ticari markasıdır.
NOT
Sacace Biotechnologies Srl
via Scalabrini, 44 – 22100 – Como – Italy Tel +390314892927
Fax +390314892926
mail: info@sacace.com web: www.sacace.com
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11
Sacace™ CMV/EBV/HHV6 Quant Real-TM
VER 10.11.11