GIDA BİYOTEKNOLOJİSİ UYGULAMA DERSİ NO:4 Enzimler, Endüstriyel Kullanım Alanları Ve Üretim Yöntemleri Enzimler Enzimler canlı hücreler tarafından oluşturulan ve kimyasal reaksiyonları spesifik olarak katalizleme yeteneğine sahip protein yapıdaki maddelerdir. Canlıdaki anabolik ve katabolik reaksiyonlarının tümü enzimlerin katalitik aktiviteleri ve yönetimleriyle gerçekleşir. Her canlı, genlerine bağlı olarak, ancak belirli enzimleri sentezleme yeteneğindedir. Daha önce de belirtildiği gibi enzimler yalnızca canlı hücreler tarafından sentezlenir. Bu enzimlerin bir kısmı hücre içinde kalır ve burada fonksiyon gösterir. Bu tip enzimlere intraselüler (hücre içi) enzimler denir. Bir kısım enzim ise, hücre içinde sentezlendikten sonra hücre dışına salınır ve burada (hücrenin içinde yer aldığı ortamda) fonksiyon gösterir. Bunlara da ekstraselülar (hücre dışı) enzimler denmektedir. Enzimlerin Üretim Yöntemleri Günümüzde endüstriyel alanda kullanılan enzimler genel olarak mikroorganizmalardan elde edilmektedir. Enzim kaynağı olarak mikroorganizmaların tercih edilmesinin nedenleri; yan ürün oluşturmalarının az olması, aktivitelerinin yüksek olması, daha ekonomik olması, stabiliteye sahip olması, yüksek oranlarda ve saflıkta üretilebilmeleri olduğu bildirilmiştir. Enzimlerin endüstriyel süreçlerde kullanılmaları işlemlerine “enzim teknolojisi” denir. Bazı özel uygulamalar için bitkisel ve hayvansal kaynaklı enzimler özel önemlerini korumakla birlikte son 30 yıldan beri teknik uygulamalar için mikrobiyal kaynaklar ağırlık kazanmaya başlamıştır. Enzimlerin mikrobiyolojik yolla üretilmesinde genellikle derin kültür tekniği kullanılır. a) Derin Kültür Yöntemi (Kesikli, Yarı Kesikli, Sürekli) Besiyeri olarak sıvı bir ortamın hazırlandığı fermentasyon yöntemidir. b) Katı Faz Kültür Yöntemi (Kesikli, Yarı Kesikli, Sürekli) İnokülasyonun katı fazdaki bir kültür ortamına yapılan fermentasyon tekniğidir. Katı-Faz Fermentasyonu Sıvı-Faz Fermentasyonu Endüstrideki Kullanım Alanları Canlı dışında da faaliyet göstermeleri enzimlerin önemini oldukça arttırmaktadır. Bugün enzimler gıda, ilaç ve kimya endüstrisinde, dericilik, boya ve temizlik maddeleri üretimi gibi konularda, biyoloji ve biyoteknoloji bilim dallarında, tıp, tarım ve veterinerlik alanlarında yaygın olarak kullanılmaktadır. Günümüzde ticari enzim preparatlarından gıda endüstrisinin yanı sıra gıda analizlerinde de yararlanılmaktadır. Ayrıca endüstrinin atık ve artıklarının değerlendirilmesinde de yararlanılarak bu atıkların yol açabileceği çevre kirlenmesinin önüne geçilmeye çalışılmaktadır. Tablo 1’de bazı enzimlerin kullanım alanı ve üretimlerinde kullanılan mikroorganizmalar verilmiştir. Tablo 1. Enzimlerin mikroorganizmalar Enzim α-amilaz β-glucanaz Katalaz Selülaz endüstriyel kullanım alanları Kullanım Alanı Maltoz ve dekstrinin yıkılması Leke çıkarıcı Unun zenginleştirilmesi Glikoz şurubu β-glukanın parçalanması berraklaştırılması. Laktaz Lipaz Pektinaz Proteaz Bacillus licheniformis yoluyla Biyosensor Laktoz Peynir altı suyu Laktozsuz gıda üretimi Deterjan katkı maddesi Yağların parçalanması Peynir Endüstrisi Meyve suyu ekstraksiyonu Şarap ve meyve suyu berraklaştırılması Deterjan katkı maddesi Deri Endüstrisi, et ekstraksiyonu Sindirime yardımcı Peynir Endüstrisi Sukraz Şekerleme Endüstrisi kullanılan Bacillus subtilis Aspergillus oryzae İçeceklerin bozulmasını önlemek için Deterjan katkı maddesi Atıkların değerlendirilmesi Renin üretimlerinde Mikroorganizma Glikoz izomeraz Glikoz, Früktoz dönüşümü Glikoz oksidaz ve biranın Aspergillus oryzae Bacillus subtilis Aspergillus niger Penicillum spp. Aspergillus spp Streptomycetes spp. Aspergillus Niger Kluyveromyces lactis Aspergillus oryzae Erwinia spp. Bacillus Subtilis Kluyveromyces lactis Mucor spp. Saccharomyces spp. “Enzimler, Endüstriyel Kullanım Alanları Ve Üretim Yöntemleri ” konusuna ait rapor soruları: 1. Sıvı-Faz Fermentasyonu veya Katı-Faz Fermentasyonu hakkında bilgi veriniz? Katı veya sıvı faz fermentasyonu ile enzim üretimin gerçekleştiği bir çalışmanın kısaca özetini açıklayınız? 2. Yukarıdaki tablodan bir enzim ele alarak üretim prosesini akım şeması halinde gösteriniz? Enzim üretiminde kullanılan hammaddeyi ve mikroorganizmayı ve üretilen enzim miktarını belirtiniz? Bonus 1: Enzim üretimi için fermentasyon besiyerinde alternatif azot kaynağı olarak kullanılan endüstriyel atıklardan üç tanesini yazınız? Bonus 2: Endüstriyel anlamda oldukça yaygın bir kullanım alanına sahip olan mannanaz enziminin endüstriyel kullanım alanlarına üç örnek verip bir tanesini kısaca açıklayınız?